電位滴定法測定酵母粉中氨基酸態氮含量
一、 前言
酵母粉是酵母沒有經過分解，但酵母浸粉的營養物質得到過分解的物質，微生物吸收利用的速度和效率更高，發酵殘留少， 憑借其優點在傳統的抗生素等發酵行業應用較廣泛。本實驗根據食品安全*標準《GB/T 5009.235-2016 食品中氨基酸態氮的測定》中對于酵母粉中氨基酸態氮含量進行測試，采用電位滴定法檢測酵母粉中氨基酸態氮含量， 具有操作簡單， 結果準確， 精度高等優點。
二、儀器與試劑
2.1、儀器
JH-T7全自動電位滴定儀， 復合 PH 電極， 容量瓶， 分析天平等
2.2、試劑
c=0.1mol/L 的 NaOH 標準滴定液， 甲醛溶液（37%） ， 去離子水
三、 實驗方法
3.1、實驗過程
3.1.1. 準備過程：用 PH=4.01、6.86、9.18 的緩沖液校對 PH 電極。
3.1.2. 空白實驗測試： 加入 50mL 去離子水（保證溶液高度沒過電極） 于滴定杯中， 放置電位滴定臺上， 開啟攪拌， 使樣品混合均勻。啟動編輯好氨基酸態氮空白測定的方法， 先滴定至 PH=8.2， 加入10mL 甲醛溶液（在方法中設置儀器可以自行添加甲醛），再滴定至 PH=9.2，記錄由 PH=8.2 到PH=9.2消耗的氫氧化鈉的滴定體積， 此為空白體積。
3.1.3. 酵母粉和蛋白胨測試過程： 準確稱取 5g 待測試樣于 100mL 容量瓶中， 用去離子水溶解， 定容
至刻度線等待測試。用 5mL 移液管準確移取溶解好的試樣 5mL 置于滴定杯中， 加 50mL（保證溶液高度沒過電極） 的去離子水， 放置電位滴定臺上， 開啟攪拌， 使樣品混合均勻。啟動編輯好的方法，先滴定至 PH=8.2，加入 10mL 甲醛溶液（在方法中設置儀器可以自行添加甲醛）， 再滴定至 PH=9.2，記錄由 PH=8.2 到 PH=9.2 消耗的氫氧化鈉的滴定體積， 減去步驟 2）測試的空白體積， 計算樣品的氨基酸態氮含量。
3.2、儀器參數如表所示：
表 1 氨基酸態氮測定滴定儀參數設置
滴定類型： | 終點滴定 | 方法名： | 氨基酸態氮含量測定 |
滴定管體積： | 10mL | 樣品計量單位： | g |
工作電極： | PH 復合電極 | 參比電極： | 無 |
攪拌速度： | 7 | 預攪拌時間： | 5s |
快滴平衡時間： | 4s | 快滴平衡電位： | 1mv |
慢滴平衡時間： | 6s | 慢滴平衡電位： | 1mv |
慢滴體積： | 0.02mL | 快滴體積： | 0.5mL |
滴定前平衡電位： | 10mV | 結束體積： | 20mv |
終點值 1（PH）： | 8.2（延時 10s） | 預控值： | 7 |
終點值 2（PH）： | 9.2（延時 10s） | 預控值： | 8 |
相關系數： | 1.4 | 結果單位： | g/100g |
滴定劑名稱： | 氫氧化鈉 | 理論濃度： | 0.1 |
輔助試劑： | 甲醛 | 添加體積： | 10mL |
參考終點： | 1 | 添加時間： | 滴定中 |
四、結果與討論
4.1、實驗結果
樣品經測試， 得到實驗結果如表 2 所示：
表 2 氨基酸態氮含量測定
樣品名稱 | 稱樣量（g） | 取樣量（mL） | c(NaOH)/ mol/L | 滴定體積V1/mL | 滴定體積 V2/mL | 空白體積 V0/mL | 氨基酸態氮（g/100g） | 平均值 (g/100g) |
RSD(%) |
酵母粉 |
5.0039 |
5 |
0.09864 | 2.000 | 12.100 |
0.760 | 5.155 |
5.1697 |
0.325 |
1.940 | 12.100 | 5.188 | |||||||
1.940 | 12.060 | 5.166 |
4.2、結論
本次測試通過 JH-T7電位滴定儀測定酵母粉含量，數據重復性好，而且使用儀器判斷減少了人工誤差，大大提高了實驗的精度。并且可以使用輔助模塊添加甲醛溶液， 既提高了實驗準確性， 又減少了有害試劑和人接觸的時間， 因此電位滴定法是該類樣品的不錯選擇。
